2-[[2-Etoksi-4-(4-hidroksi-1-piperidinil) fenil]amino]-5,11-dihidro-5,11-dimetil-6H-pirimid[4,5-b][1,4]benzodiazepin-6-

Ürün Tanımı:

Ürün Adı: 2-[[2-Ethoxy-4-(4-hidroksi-1-piperidinil) fenil]amino]-5,11-dihidro-5,11-dimetil-6H-pirimido[4,5-b][1,4]benzodiazepin-6-one CAS NO:1234480-50-2

Eşanlamlılar:

XMD 8-92 (serbest baz);

6H-Pirimido[4,5-b][1,4]benzodiazepin-6-one,2-[[2-etoksi-4-(4-hidroksi-1-piperidinil)fenil]amino]-5,11-dihidro-5,11-dimetil-;

Kimyasal ve Fiziksel Özellikler:

Görünüşü: Beyaz veya beyaz toz

Test: ≥98.0%

yoğunluk:1.3 g/cm3

Kaynama noktası:741.8°C 760 mmHg

Flaş Noktası:402.4°C

Vitro

XMD8-92, ölçülen 80 nM'lik disosyasyon sabiti (Kd) ile BMK1'ye en büyük afinite gösterirken, DCAMKL2, TNK1 ve PLK4 sırasıyla 190, 890 ve 600 nM'lik Kd ′ler gösterir.XMD8-92, KiNativ yöntemiyle HeLa hücre lizatlarındaki tüm tespit edilebilir kinazlara karşı profilleştirildi ve IC50 1 ile BMK1 için yaklaşık 10 kat daha seçici olduğu bulundu.En güçlü dış hedeflerden TNK1 (IC50=10 μM) ve ACK1 (aka TNK2, IC50=18 μM) 'den.5 μM. Diğer zayıf dış hedefler arasında RSK1 ve RSK2, PIK4A ve PIK4B'nin kinaz alanı 2 ve FAK bulunur.MEK5, XMD8-92 tarafından 50 μM'ye kadar önemli ölçüde engellenmez.[1]. XMD8-92, in vitro ATP sitesi rekabet bağlama testinde 402 kinazlara ve ayrıca KiNativ yönteminde HeLa hücre lizatlarında tüm tespit edilebilir kinazlara karşı BMK1' e karşı yüksek seçicilik göstermektedir.XMD8-92, 240 nM' lik IC50 ile BMK1' in EGF tarafından tetiklenmesini engeller., 5 μM kadar yüksek bir konsantrasyonda, XMD8-92 EGF [2] tarafından ERK1/2 aktivasyonuna engelleyici bir etkisi yoktur.

Canlı olarak

XMD8-92 in vivo'da tümör büyümesini% 95 oranında önemli ölçüde inhibe eder. XMD8-92'nin farmakokinetiği Sprague-Dawley farelerinde tek bir intravenöz veya oral doz verildiğinde değerlendirilir. XMD8-92'nin 2.0 saatlik yarılanma süresi 26 mL/min/kgXMD8-92' nin dokularda orta bir dağılımı vardır ve hesaplanan dağılım hacmi 3, 4 L/ kg' dur.2 mg/kg bir kez oral doz aldıktan sonra, yaklaşık 500 nM maksimum plazma konsantrasyonları 30 dakika sonra gözlemlenirken, dozdan 8 saat sonra 34 nM kalır.ilacın yüksek plazma konsantrasyonları (IP 50 mg/kg dozu aldıktan sonra yaklaşık 10 μM) 14 gün boyunca korunur.. XMD8-92 iyi tolere edildiği ve fareler herhangi bir sıkıntı belirtisi olmadan sağlıklı göründüğü görülmektedir. XMD8-92 ile tedavi edilen farelerde damar dengesizliği gözlemlenmemiştir[1].Hem bağışıklık yeteneğine sahip hem de bağışıklık eksikliği olan farelerde XMD8-92 tedavisi akciğer ve servikal ksenograf tümörlerinin büyümesini engelledi.% 95 oranında. This remarkable anti-tumor effect of XMD8-92 in lung and cervical xenograft tumor models is due to XMD8-92’s capacity to inhibit tumor cell proliferation through the PML suppression-inducted p21 checkpoint proteinAyrıca, farelerde BMK1 knockout (KO), BMK1 proteininin tamamen ve geri dönüşü olmayan bir şekilde çıkarılmasına yol açar.Farelerde XMD8-92 tedavisi sadece BMK1 aktivitesini bastırır.İkincisi, BMK1 KO farelerinde gözlemlenen damar dengesizliği, BMK1'in C-terminal kinase olmayan alanının olmamasından kaynaklanabilir.Hayvanların XMD8-92 tedavisinde hala mevcuttur [2].

Kinase Assay

XMD8-92' nin KiNativ profili, aşağıdaki değişikliklerle hem ATP hem de ADP asilfosfat- desthiobiotin ile gerçekleştirilir.HeLa hücre lizatları (toplam protein 5 mg/ml) 50 μM'de XMD8-92 varlığında inkube edilir., 10 μM, 2 μM, 0.8 μM ve 0 μM, ATP veya ADP asilfosfat sondası (5 μM son prob konsantrasyonu) eklenmeden önce 15 dakika boyunca.Sonda reaksiyonları 10 dakika sürdü ve reaksiyon idrar eklenmesiyle durduruldu ve MS analizi için işlendi.. Samples are analyzed by LC-MS/MS on a linear ion trap mass spectrometer using a time segmented “target list” designed to collect MS/MS spectra from all kinase peptide-probe conjugates that can be detected in HeLa cell lysatesBu hedef listesi, HeLa lizatlarının önceden kapsamlı bir analizi ile oluşturulur ve doğrulanır.Her kinase için sinyalleri çıkarmak için her kinase peptit-sondaj konjugatı için en fazla dört karakteristik fragman iyonu kullanılır, ve inhibitörle tedavi edilen ve kontrol (eğlenmemiş) lizatların karşılaştırılması, her noktada inhibe oranının %'ini kesin bir şekilde belirlemeye olanak tanır.Bu hedefli kütle spektrometri yaklaşımının ayrıntılarını açıklayan bir elyazması hazırlanmaktadır.[1].

Hayvan Yöneticisi

Fareler[1] 5×105 HeLa hücreleri DMEM'de resuspend edilir ve 6 haftalık Nod/Scid farelerinin (gün 0) sağ kanadına subkutan olarak enjekte edilir.Fareler 2 gruba (6 hayvan) rastgele ayrıldı.XMD8-92 (1-28 gün) grubu, günde iki kez 50 mg/ kg dozda XMD8-92 ile intraperitoneal olarak tedavi edilir.Kontrol grubu kontrol olarak taşıyıcı çözeltinin günlük enjeksiyonlarını alır.7. günde kontrol grubu 2 gruba (6 hayvan, XMD8-92, 7-28 gün ve 12 hayvan, kontrol) rastgele ayrılır.Geriye kalan kontrol grubu 2 gruba (6 hayvan) rastgele ayrılır.XMD8-92 (7-28 gün) ve XMD8-92 (14-28 gün) gruplarında XMD8-92 ile tedavi sırasıyla 7. ve 14. günde başlatılır.Tümörün boyutu bir kaliperle ölçülür., ve tümör hacmi belirlenir[1].

Referanslar:

[1] Yang Q, et al. BMK1'in farmakolojik inhibe edilmesi, promyelocytic lösemi proteini aracılığıyla tümör büyümesini bastırır. Kanser Hücresi. 2010 Eylül 14;18 ((3):258-67.

Yang Q, et al. Kanser tedavisinde BMK1 MAP kinaz yolunu hedeflemek. Clin Kanser Res. 2011 Jun 1;17(11):3527-32.

[3] Umapathy G, et al. Kinase ALK, onkogen MYCN'in nöroblastomadaki ekspresyonunu teşvik etmek için kinase ERK5'i uyarır. Sci Signal. 2014 Oct 28;7 ((349):ra102.

Ürünlerimizle ilgileniyorsanız veya herhangi bir sorunuz varsa, lütfen bizimle iletişime geçmekten çekinmeyin!

Patentli ürünler yalnızca Ar-Ge amacıyla sunulur.